鲤春病毒血症病毒基质蛋白基因的原核表达及多克隆抗体的制备

根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)基因组序列(GenBank:NC_002803),人工合成M基因开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化工程菌株BL21 (DE3),在0.1 mmol·L-1 IPTG、37℃下诱导5h,获得高效表达的M蛋白,但其主要以包涵体的形式存在,经超声破碎、包涵体纯化后,再...     

L-肉碱强化卤虫对鲤鱼开口苗脂肪酸组成和C/N比率的影响

【目的】研究L-肉碱强化卤虫对鲤鱼开口苗脂肪酸组成和C/N比率的影响,为鲤鱼开口苗的饲养提供参考。【方法】分别用质量浓度为0(对照),1,100,1 000 mg/L的L-肉碱强化卤虫无节幼体(Artemiasp.)12和24h,然后投喂给鲤鱼(Cyprinus carpio)开口苗,21 d后测定鱼苗的脂肪酸组成和C/N比率。【结果】投喂L-肉碱强化12 h的卤虫时,1 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的∑C14-24脂肪酸含量、饱和脂肪酸含量和单不饱和脂肪酸含量较对照组显著降低(P<0.05);1 000 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的单不饱和脂肪酸含量较对照组显著升高(P<0.05);L-肉碱对鲤鱼开口苗的多不饱和脂肪酸含量、∑n-3+∑n-6和∑DHA+EPA含量均无显著影响(P>0.05);1 000mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的C/N比率显著低于对照组和1 mg/L L-肉碱处理组(P<0.05)。投喂L-肉碱强化24 h的卤虫时,1和100 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的∑C14-24脂肪酸和饱和脂肪酸含量较对照组显著降低(P<0.05),但2组之间差异不显著(P>0.05);1 000 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的∑C14-24脂肪酸和饱和脂肪酸含量较对照组显著升高(P<0.05);1 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的单不饱和脂肪酸含量较其他3组显著降低(P<0.05),多不饱和脂肪酸、∑n-3+∑n-6和∑DHA+EPA含量与对照组差异不显著(P>0.05);100 mg/L和1 000 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的多不饱和脂肪酸、∑n-3+∑n-6和∑DHA+EP A含量较对照组显著升高(P<0.05),且2组之间差异显著(P<0.05);1,100 mg/L L-肉碱处理组鲤鱼开口苗的C/N比率较对照组和1 000 mg/L L-肉碱处理组显著降低(P<0.05)。【结论】本试验条件下,以质量浓度100 mg/L L-肉碱强化卤虫24 h后再投喂鲤鱼开口苗,可显著改善鲤鱼开口苗的脂肪酸组成和C/N比率。     

采用酸碱提取法对鲢肌肉蛋白分离特性的影响

对酸处理和碱处理过程中鲢肌肉蛋白质的分离特性,包括蛋白质溶解度、回收率和匀浆黏度等进行了比较研究。结果表明：当pH为1．5—12．5时,普通肉溶解蛋白（Solutionordinarymuscleprotein,SMP-1）与血合肉溶解蛋白（Solutiondarkmuscleprotein,SMP-2）溶解度的变化规律无明显差别,酸处理的最大溶解度均在pH为2．5下,碱处理的最大溶解度均在pH为11．5～12．5下,两者等电点均在pH为5．5下;普通肉匀浆（Ordinarymusclehomogenate,OMH）和血合肉匀浆（Darkmusclehomogenate,DMH）的黏度均随溶解度的增加而增加,但OMH黏度要高于DMH;采用酸碱处理法的蛋白质回收率都非常高,IMP-1最高能达到90．5％,IMP-2也能达到89．5％。     

微生态制剂和着色剂对锦鲤体色的影响

以锦鲤Cyprinus carpio皮肤（带鳞片）和尾鳍中的总类胡萝卜素含量作为锦鲤体色的衡量标准,研究了微生态制剂（投喂和泼洒）与着色剂对红色锦鲤幼鱼体色的影响。结果表明：对照组锦鲤皮肤中的总类胡萝卜素含量随饲养时间的延长逐渐增加,并在饲养的第8周达到最大值（38.69 mg/kg±8.64 mg/kg）;投喂着色剂和微生态制剂的两组锦鲤皮肤中总类胡萝卜素含量也随投喂时间的延长显著增加（P〈0.05）,均在第6周达到最大值,分别为（45.78±3.16）mg/kg和（53.91±4.49）mg/kg,在停止投喂着色剂和微生态制剂两周后,该两组锦鲤皮肤中的总类胡萝卜素含量均有所降低,分别为（44.05±4.78）mg/kg和（50.99±5.45）mg/kg;而只投喂微生态制剂的两个试验组和只泼洒微生态制剂的两个试验组锦鲤皮肤中的总类胡萝卜素含量均随饲养时间的延长而逐渐增加,在试验的第8周达到最大值,与对照组表现出相同的规律,且投喂微生态制剂的两个试验组在数值上要略高于对照组,分别为（40.21±5.74）mg/kg和（39.74±4.96）mg/kg,而泼洒微生态制剂的两个试验组与对照组含量相当,分别为（38.31±9.31）mg/kg和（38.34±6.78）mg/kg。这说明微生态制剂无论是作为饲料添加剂投喂或是水体泼洒使用对锦鲤体色的作用都是安全的,并且投喂微生态制剂虽然短时间内对锦鲤体色的影响不明显,但长时间投喂可以在一定程度上起到增色的作用,不会因停止使用而发生褪色的现象。微生态制剂和着色剂对锦鲤尾鳍中总类胡萝卜素含量的影响不明显。     

饲料脂肪水平对锦鲤体色和几项免疫指标的影响

研究了在螺旋藻添加的质量分数为12%时,饲料脂肪水平（5.36%、7.74%、10.52%、12.85%和15.45%均为质量分数）对红白锦鲤Ornmmental carp幼鱼（初始体质量为5.85 g±0.19 g）体色和免疫指标的影响。每组设3个重复,每个重复组饲养10尾锦鲤,表观饱食投喂60 d。结果表明：当饲料中脂肪水平为10.52%时,试验鱼皮肤中类胡萝卜素含量显著高于其它试验组（P〈0.05）,体表红质的a＊值最高;试验鱼肝胰脏中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活力随脂肪水平的升高而下降,饲料脂肪水平对碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等免疫指标没有产生显著影响（P〉0.05）。上述研究说明,在配合饲料中添加一定量的螺旋藻时,锦鲤着色效果最好时的适宜饲料脂肪水平为10.52%,提高饲料脂肪水平不会持续提高锦鲤对螺旋藻的利用效率。     

饲料中添加女贞子对镜鲤生长性能、消化酶活性以及肌肉品质的影响

研究了饲料中添加女贞子Ligustrumlucidum对镜鲤Cyprinuscarpioyar．Specularis的生长性能、消化酶活性及肌肉品质的影响。试验共设5个处理组：A组为基础饲料空白对照组;B组,在基础饲料中添加200mg／kg的大蒜素（纯度为25％）;C、D、E组,在基础饲料中分别添加质量分数为0．5％、1．0％、1．5％的女贞子粉。每个处理组设置3个重复,每个重复组放10尾鱼（初始体质量为125．55g±19．14g）。试验共进行12周。结果表明：与空白组相比,添加女贞子粉试验组镜鲤的特定生长率和增重率显著降低（P〈0．05）;女贞子粉对镜鲤中肠和后肠消化酶的活性均没有显著影响（P〉0．05）;除D组外,其它试验组镜鲤前肠淀粉酶的活性显著提高（P〈0．05）;各试验组镜鲤前肠蛋白酶的活性均无显著差异（P〉0．05）;女贞子试验组镜鲤肌肉的持水能力和D组的pH1值显著降低（P〈0．05）,对肌肉营养成分无显著影响。     

不同水温和饲料蛋白质水平对镜鲤血清生化指标的影响

研究了不同水温和饲料蛋白质水平对镜鲤Cyprinus specularis血清生化指标的影响。试验中设3个温度梯度（18、22、26℃）,每个温度下投喂5种含不同蛋白质水平（质量分数为29%、31%、34%、38%、40%）的饲料,共15组,每组设3个重复,每个重复放14尾鱼,共饲喂60 d。结果表明：镜鲤血清中的肌酐（CREA）浓度随饲养水温的升高而降低,在22、26℃下CREA浓度显著低于18℃下（P〈0.05）;血清中总胆固醇（CHOL）浓度随水温的升高而升高,在22℃和26℃下CHOL浓度显著高于18℃下（P〈0.05）;血清中甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDH）、谷草转氨酶（AST）浓度和AST/ALT在22℃下比18℃和26℃下有所降低,但无显著差异（P〉0.05）。各水温环境下,血糖（GLU）、总蛋白（TP）、球蛋白（GLB）、白蛋白（ALB）浓度随饲料中蛋白质水平的增加而升高;在18℃下,LDH浓度随蛋白质水平的增加而逐渐降低,其中38%蛋白质组显著高于29%蛋白质组（P〈0.05）;在22℃下,CHOL浓度随蛋白质水平的增加而降低,其中40%蛋白质组显著低于其它蛋白质组（P〈0.05）;在26℃下,40%蛋白质组的谷丙转氨酶（ALT）活性显著高于31%和34%蛋白质组（P〈0.05）。这表明22℃下比18、26℃下更有利于镜鲤的营养代谢,18、22、26℃下,饲料中蛋白质的质量分数分别为38%、40%、40%时,有利于改善镜鲤血清生化指标。     

鲤遗传连锁图谱的构建

利用JoinMap 4.0软件包,以德国镜鲤选育系为祖父母所培育的自交F2群体的68个个体为作图群体,首次以新型分子标记单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)为主要作图标记,以微卫星(Simple Sequence Repeats,SSR)和表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)为辅助标记,采用CP(CrossPollinators)模型构建鲤的遗传连锁图谱。构建的遗传连锁图谱含有560个标记(174个SSR标记、41个EST-SSR标记和345个SNP标记),分布在50个连锁群上,最大连锁群由60个标记组成,最小连锁群仅含2个标记,平均每个连锁群有11.2个标记。最大连锁群的图距为198.1厘摩(centimorgan,cM),最小的连锁群图距为1.5 cM,图谱总图距为3 295.92 cM,标记间平均间距为7.21 cM,图谱覆盖率为76.26%。构建的图谱为中等密度的遗传连锁图谱可为进一步的鲤相关经济性状的QTL定位研究和分子标记辅助选择育种(MAS)打下基础。研究亮点:首次以新型分子标记SNP为主要作图标记并以SSR标记为...     

饲料中添加植酸酶对草鱼生长、体组成及各组织磷含量的影响

选用初重为(39.68±3.05)g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼作为试验对象,在全植物蛋白基础饲料中添加植酸酶,设5种不同的植酸酶添加水平(500 U/kg、750 U/kg、1 000 U/kg、1 250 U/kg、2 500 U/kg),另设2个对照组,对照组1:全植物蛋白基础饲料中只添加1.5%的无机磷;对照组2:全植物蛋白基础饲料不添加植酸酶和无机磷,通过60 d的试验,探讨和研究植酸酶对草鱼生长、体组成及各组织磷含量的影响。结果表明,对照组1鱼体的特定生长率最大,饲料系数显著低于其它各组(P<0.05);与对照组2相比较,全植物蛋白饲料中添加植酸酶后,当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时,草鱼的饲料系数显著降低、蛋白质效率得到显著提高;植酸酶对草鱼的形体指标没有显著影响;当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时鱼体粗脂肪含量有所降低;当植酸酶添加水平为1 000 U/kg时,其肌肉粗脂肪含量显著提高;添加植酸酶后鱼体、肌肉和脊椎骨中的磷含量有一定提高,且当植酸酶添加水平为1 250 U/kg时,肌肉和脊椎骨中的磷含量显著提高。结果表明,当植酸酶添加水平在1...     

饲料中添加植酸酶对草鱼生长、体组成及各组织磷含量的影响

选用初重为（39.68±3.05） g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼作为试验对象,在全植物蛋白基础饲料中添加植酸酶,设5种不同的植酸酶添加水平（500 U/kg、750 U/kg、1 000 U/kg、1 250 U/kg、2 500 U/kg）,另设2个对照组,对照组1：全植物蛋白基础饲料中只添加1.5%的无机磷;对照组2：全植物蛋白基础饲料不添加植酸酶和无机磷,通过60 d的试验,探讨和研究植酸酶对草鱼生长、体组成及各组织磷含量的影响。结果表明,对照组1鱼体的特定生长率最大,饲料系数显著低于其它各组（P<0.05）;与对照组2相比较,全植物蛋白饲料中添加植酸酶后,当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时,草鱼的饲料系数显著降低、蛋白质效率得到显著提高;植酸酶对草鱼的形体指标没有显著影响;当植酸酶添加水平大于1 000 U/kg时鱼体粗脂肪含量有所降低;当植酸酶添加水平为1 000 U/kg时,其肌肉粗脂肪含量显著提高;添加植酸酶后鱼体、肌肉和脊椎骨中的磷含量有一定提高,且当植酸酶添加水平为1 250 U/kg时,肌肉和脊椎骨中的磷含量显著提高。结果表明,当植酸酶添加水平在1 000 U/kg～1250 U/kg时,与对照组2相比较,全植物蛋白饲料中添加植酸酶可提高草鱼的特定生长率和蛋白质效率、降低饲料系数,并显著提高草鱼磷的积累。若欲减少无机磷添加量,建议植酸酶添加水平为1 000 U/kg～1 250 U/kg。